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產(chǎn)品信息

產(chǎn)品簡介

本釋放劑可用于全血、血清、血漿、尿液、唾液、口腔拭子、鼻咽拭子、細胞懸液等動物樣品，或根、莖、葉、花、種子等植物樣品的核酸（DNA、RNA均可）提取、富集、純化等步驟，核酸釋放劑處理后的裂解產(chǎn)物可直接用于Marathon DNA Polymerase（BT0016）的PCR擴增，RPA核酸擴增試劑盒，RT RPA核酸擴增試劑盒和RPA核酸擴增試劑盒（試紙條法）的等溫擴增。無須添加溶菌酶、溶葡萄球菌素或蛋白酶K等酶制劑，也無須使用酚、氯仿等有害化學(xué)試劑。一步、單管操作，方便快捷，操作時間不足1 min。靈敏度高，重現(xiàn)性好。用本試劑盒處理后，取1~15μL裂解產(chǎn)物上清液做模板進行PCR，可穩(wěn)定擴增添加量為10的1次方拷貝的靶基因。可用于食品安全、疾控、突發(fā)傳染病、動物疫情、分子診斷、精準用藥基因檢測前的樣品處理。

步驟：

1.動物樣本

全血、血清、血漿、尿液、唾液、口腔拭子、鼻咽拭子、細胞懸液等樣品經(jīng)適當(dāng)處理后，按快閃核酸釋放劑（BT6008）：液體樣品=1：7的比例與待檢樣本混合即可。當(dāng)樣品濃度較低時,建議裂解體系≥ 50 μL，即可確保證裂解產(chǎn)物內(nèi)含有可檢出的足量核酸樣品。

混合后的溶液用槍頭或一次性塑料吸管充分吸打20次后，吸取上清液至一干凈的離心管內(nèi)，待檢。

PCR、RPA或RT RPA擴增時，裂解產(chǎn)物上清液可加至反應(yīng)體系允許的最大添加量。

2.植物樣本

待檢材料經(jīng)簡單沖洗后，剪成2~5mm見方的小塊或小段，加入100μL的快閃核酸釋放劑（BT6008），并以槍頭碾壓待檢材料數(shù)次，對樣本進行簡單的破碎處理后，用槍頭或一次性塑料吸管充分吸打20次后，吸取上清液至一干凈的離心管內(nèi)，待檢。

PCR、RPA或RT RPA擴增時，可吸取1μL的裂解產(chǎn)物上清液進行檢測即可。

擴增體系中裂解產(chǎn)物的添加量：如出現(xiàn)待檢樣品、陽性對照及陰性對照樣品裂解后的檢測結(jié)果與實際不符的情況，可按裂解產(chǎn)物添加體積±2µL的梯度設(shè)置平行試驗，確定同一擴增體系內(nèi)裂解產(chǎn)物體積不同添加量對樣品、陽性對照及陰性對照的檢測情況是否有影響，在確保陽性對照檢測結(jié)果為陽性，陰性對照檢測結(jié)果為陰性的情況下，選取最大的裂解產(chǎn)物添加量。因快閃核酸釋放劑具有抑制非特異性擴增的作用，在陰性對照均檢測為陰性，陽性對照均檢測為陽性的情況下，可按擴增體系的最大添加樣品添加體積添加裂解產(chǎn)物。

注意事項：

1.本釋放劑用于全血、血清、血漿、尿液、唾液、口腔拭子、鼻咽拭子、細胞懸液等樣品的核酸提取時，應(yīng)盡量在樣本采集后立刻完成樣本處理。如條件不允許，應(yīng)以冷藏或冷凍方式運輸樣本。

2.如用于傳染性疾病樣本檢測時，操作時需注意安全防護，應(yīng)在規(guī)定的實驗場所進行，穿戴防護衣物、一次性手套和口罩等；所有直接接觸過病原物樣品的物品應(yīng)消毒后再丟棄或再次使用。

3.本釋放劑目標(biāo)為動物液體樣本的快速粗處理，處理物可用于Marathon DNA Polymerase（BT0016）的PCR擴增，RPA核酸擴增試劑盒，RT RPA核酸擴增試劑盒和RPA核酸擴增試劑盒（試紙條法）的等溫擴增。處理物不可用于紫外分光光度定量等對核酸純度要求較高的實驗。

4.快閃核酸釋放劑（BT6008）裂解樣品時，快閃核酸釋放劑（BT6008）為8×溶液，裂解體系為快閃核酸釋放劑（BT6008）：液體樣本=1：7，該比例經(jīng)反復(fù)優(yōu)化，切勿隨意調(diào)整！

5. PCR、RPA或RT RPA擴增時，處理物上清液可加至反應(yīng)體系允許的最大添加量。擴增模板為DNA時，-20℃保存的處理液上清液可于24 h內(nèi)多次、重復(fù)使用。PCR或RPA反應(yīng)的成功，與引物設(shè)計、循環(huán)參數(shù)或擴增時間設(shè)置密切相關(guān)。如使用本試劑盒處理樣品后，擴增失敗，請確認用其它方法提取核酸的PCR或RPA反應(yīng)是否成功。

6.本試劑僅用于科研用途，請勿用于臨床、食品等。

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