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產品簡介

DAPI，也稱DAPI dihydrochloride，是一種常用的核酸染料，可以和雙鏈DNA富含AT序列的小溝結合，產生比自身強20多倍的藍色熒光。和EB(ethidium bromide)相比，DAPI對雙鏈DNA的染色靈敏度要高很多倍。DAPI也可對RNA進行染色，染色機理是其可以選擇性嵌入“AU序列”并發(fā)出熒光。相比DAPI-dsDNA(Ex/Em=358 nm/461 nm)，DAPI-RNA具有較長的最大發(fā)射波長(500 nm)，其熒光亮度僅有DAPI-dsDNA的20%。

盡管DAPI不能通過活細胞膜，但可以通過提高濃度使之進入活細胞。DAPI具有很高的光漂白承受水平，能用來檢測酵母線粒體DNA，葉綠體DNA，病毒DNA，Microplasm DNA以及染色體DNA。

DAPI典型的藍色熒光特性使其非常普遍的搭配其他綠色、黃色或紅色熒光染料用于細胞生物學多色熒光標記技術，因此也常作為核酸和染色體的復染劑用于細胞凋亡檢測、RNA原位雜交、直接或間接免疫檢測等領域，其染色后可用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。

本產品為溶液，分為2種形式，濃度為5 mg/mL和即用型，即用型產品濃度已經過優(yōu)化，確保可以滿足各種常規(guī)染色的需要。另外提供粉末形式的DAPI供客戶選購。

產品性質

 中文名稱（Chinese Synonym） 4’,6-聯脒-2-苯基吲哚二鹽酸鹽

英文名稱（English Synonym）4’,6-Diamidino-2-phenylindole, dihydrochloride

CAS號（CAS NO.）  28718-90-3

分子式（Molecular Fomular）  C16H17Cl2N5·2HCl

分子量（Molecular Weight）350.25

熒光光譜（Fluorescence Spectral）

DAPI的Ex/Em=340 nm/488 nm; DAPI-DNA的Ex/Em=358 nm/461 nm

使用方法

1）取適量1mM DAPI水溶液加到PBS* 中，制備成10-50 μM的DAPI溶液。

* 推薦以下PBS的配制方法：NaCl: 8.00g KCl: 0.20g Na2HPO4 .12H2O: 2.9g KH2PO4: 0.2g 以上試劑溶解于1000 ml純水中。

（2）將1/10培養(yǎng)基體積的DAPI溶液加入到細胞培養(yǎng)基中。（也可以用1/10濃度的DAPI緩沖液代替培養(yǎng)基。）

（3）在37℃培養(yǎng)細胞10-20分鐘。

（4）用PBS或合適的緩沖液洗細胞兩次。

（5）用帶有360 nm激發(fā)波長，460 nm發(fā)射波長的濾光片的熒光顯微鏡觀察細胞。

運輸與保存方法

 冰袋運輸，5 mg/mL的DAPI儲存液于-20oC避光保存，1年有效。即用型的DAPI 染液于4℃避光保存，有效期6個月。

注意事項

1）DAPI對人體有一定刺激性，請注意適當防護。

2）熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡量當天完成檢測。

3）為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。

4）低濃度的DAPI不容易穿透細胞膜。

5）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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